ProbeMaster® ROX, 5× реакционная смесь
ProbeMaster® ROX — готовая 5-кратная реакционная смесь, содержащая все необходимые компоненты для проведения количественной ПЦР с применением интеркалирующих красителей или гидролизуемых зондов. Eе состав оптимизирован для получения идеальных результатов с минимальным значением порогового цикла и высоким уровнем отношения сигнал/фон. Формат готовой реакционной смеси снижает риск контаминации образцов.
ProbeMaster® ROX позволяет решать большое количество задач с минимальными затратами времени. Смесь подходит для точного определения содержания ДНК матрицы в пробе и может применяться для определения уровня копийности и экспрессии генов, генотипирования, детекции SNP и других приложений.
Состав реакционной смеси:
- HS Taq ДНК-полимераза;
- смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов;
- ПЦР-буфер (содержит Mg2+);
- референсный краситель ROX
Ключевые характеристики смеси:
- Смесь полностью готова к применению. Для постановки реакции остается добавить интеркалирующий краситель или зонд для детекции продукта амплификации, образец ДНК, праймеры и воду.
- Объём 5-кратной смеси 500 мкл рассчитан на проведение 100 реакций по 25 мкл.
- Смесь подходит для ПЦР фрагментов длиной до 3 тыс. п.о., не более 70% GC, не требующих высокоточной амплификации.
- В качестве матрицы может использоваться геномная, вирусная, плазмидная ДНК и др.
- В состав реакционной смеси входит Taq-полимераза с технологией «горячего старта». Используемая HS Taq ДНК-полимераза представляет собой комплекс моноклональных антител с ферментом. Прогрев образца в первом цикле ПЦР приводит к инактивации антител в составе комплекса и активирует фермент. Технология «горячего старта» позволяет предотвратить неспецифическую амплификацию и образование димеров праймеров.
- Входящая в состав HS Taq ДНК-полимераза обладает 5′-3′ полимеразной, 5′-3′ экзонуклеазной, аденилтрансферазной активностью.
- Для детекции флуоресценции следует использовать ДНК-зонд, меченный флуорофором и тушителем (гидролизуемые зонды, «молекулярные маяки», праймеры типа «скорпион») или два зонда, меченных флуорофорами, образующими FRET-пару (вы можете заказать синтез зондов в Lumiprobe).
- Референсный краситель ROX, входящий в состав смеси, позволяет нормировать интенсивность флуоресценции зондов и интеркалирующих красителей типа dsGreen. Концентрация ROX была специально оптимизирована для работы на большинстве real-time амплификаторов, доступных на рынке.
- Не содержит UDG и dUTP.
- Смесь подходит для приложений, в которых не могут использоваться урацил-содержащие продукты амплификации.
Совместимость с оборудованием:
Реакционная смесь ProbeMaster® ROX совместима с большинством амплификаторов для ПЦР в реальном времени, в том числе производства Applied Biosystems (7300, 7500, 7500 Fast, 7900HT, QuantStudio 12k Flex,QuantStudio 3, QuantStudio 5, QuantStudio 6 Flex, QuantStudio 7, StepOne, StepOnePlus, ViiA 7 System), Bio-Rad (CFX384, CFX 96, iQ5), Roche (LC 480), Stratagene (MX3000P, MX3005P, MX4000) и др.
Таблица подбора мастер-микса для ПЦР
Реакционные смеси для количественной ПЦР (ПЦР-РВ) | |||||
---|---|---|---|---|---|
Название смеси | dsGreen | Eva488 | ROX | UDG, dUTP | Применение |
ProbeMaster®️ UDG Cat.# •7514 | — | — | — | ✔ | кПЦР с ДНК-зондами или интеркалирующим красителем |
ProbeMaster® ROX Cat.# •7114 | — | — | ✔ | — | |
ProbeMaster®️ Eva488 Cat.# •7614 | — | ✔ | — | — | |
ProbeMaster®️ Eva488 ROXCat.# •7714 | — | ✔ | ✔ | — | |
Реакционная смесь для стандартной ПЦР | |||||
ProbeMaster® GEL Cat.# •7024 | — | — | — | — | ПЦР с последующим анализом методом гель-электрофореза, содержит краситель для нанесения на гель |
Универсальная реакционная смесь | |||||
ProbeMaster®️ UNI Cat.# •7534 | — | — | — | — | кПЦР с ДНК-зондами/интеркалирующим красителем или стандартная ПЦР с последующим анализом методом гель-электрофореза |
Recommended protocol
Calculator
Customers also purchased with this product
ROX reference dye for qPCR
ROX is a passive reference dye for qPCR amplification. The dye can be used to normalize fluorescence intensity of reporter dye in qPCR.DAPI, blue fluorescent nucleic acid stain
DAPI (4′,6-diamidino-2-phenylindole) is a blue-emitting fluorescent DNA dye used for chromosome staining and as a nuclear counterstain in fluorescence microscopy and flow cytometry.Общие свойства
Условия хранения: | Хранение: 12 месяцев (с момента доставки) при -20°C. Транспортировка: до 5 дней при температуре от 0 до +25°С. |
MSDS: | Download |
Product specifications |